Mga produkto

Ang paagi diin ang mga epekto sa dungan nga mutasyon maghiusa aron mabag-o ang kalihokan sa enzymatic dili dali matag-an tungod kay kini nga mga epekto dili kanunay nga additive sa usa ka linear nga paagi.Busa, ang pag-ila sa mga epekto sa dungan nga mutasyon sa mga residue sa amino acid nga nagbugkos sa substrate makahimo og dakong kontribusyon sa pagsabot sa espesipiko sa substrate sa mga enzyme.Sa beta-glycosidase gikan sa Spodoptera frugiperda (Sfbetagly), ang duha nga nahabilin nga Q39 ug E451 nakig-uban sa substrate ug kini hinungdanon alang sa pagtino sa espesipiko sa substrate.Doble nga mutants sa Sfbetagly (A451E39, S451E39 ug S451N39) giandam sa site-directed mutagenesis, gipahayag sa bakterya ug giputli gamit ang affinity chromatography.Kini nga mga enzyme gihulagway gamit ang p-nitrophenyl beta-galactoside ug p-nitrophenyl beta-fucoside isip substrate.Ang k cat/Km ratio para sa single ug double mutants sa Sfbetagly nga adunay site-directed mutations sa mga posisyon Q39 ug E451 gigamit aron ipakita nga ang epekto sa libre nga enerhiya sa ESdouble dagger (enzyme-transition state complex) sa double mutations (Gdouble daggerxy) dili ang sumada sa mga epekto nga resulta sa usa ka mutasyon (Gdouble daggerx ug Gdouble daggery).Kini nga kalainan sa Gdouble dagger nagpakita nga ang mga epekto sa usa ka mutation partially overlap.Busa, kini nga kasagarang epekto kausa ra maisip sa Gdouble daggerxy.Ang crystallographic nga datos sa beta-glycosidases nagpadayag sa presensya sa usa ka bidentate hydrogen bond nga naglambigit sa mga residue Q39 ug E451 ug sa samang hydroxyl nga grupo sa substrate.Busa, ang thermodynamic ug crystallographic nga datos nagsugyot nga ang mga residue Q39 ug E451 adunay usag usa nga impluwensya sa ilang tagsa-tagsa nga interaksyon sa substrate.