Mga produkto

Ang X-gal (gipamubo usab nga BCIG alang sa 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside) maoy usa ka organikong compound nga gilangkoban sa galactose nga gisumpay ngadto sa gipuli nga indole.Ang compound gi-synthesize ni Jerome Horwitz ug mga kolaborator niadtong 1964. Ang pormal nga kemikal nga ngalan kasagaran gipamub-an ngadto sa dili kaayo tukma apan dili kaayo hasol nga mga prase sama sa bromochloroindoxyl galactoside.Ang X gikan sa indoxyl mahimong tinubdan sa X sa X-gal contraction.Ang X-gal sagad gigamit sa molecular biology aron sulayan ang presensya sa usa ka enzyme, β-galactosidase, puli sa naandan nga target niini, usa ka β-galactoside.Gigamit usab kini aron mahibal-an ang kalihokan niini nga enzyme sa histochemistry ug bacteriology.Ang X-gal maoy usa sa daghang indoxyl glycosides ug ester nga makahatag ug dili matunaw nga asul nga mga compound susama sa indigo dye isip resulta sa enzyme-catalyzed hydrolysis.

Ang X-gal usa ka analogue sa lactose, ug busa mahimong ma-hydrolyzed sa β-galactosidase enzyme nga nagbungkag sa β-glycosidic bond sa D-lactose.Ang X-gal, sa dihang gibuak sa β-galactosidase, mopatunghag galactose ug 5-bromo- 4-chloro-3-hydroxyindole - 1. Ang naulahi dayon mo-dimerize ug ma-oxidize ngadto sa 5,5'-dibromo-4,4'-dichloro -indigo - 2, usa ka grabe nga asul nga produkto nga dili matunaw.Ang X-gal mismo walay kolor, busa ang presensya sa asul nga kolor nga produkto mahimong gamiton isip pagsulay sa presensya sa aktibo nga β-galactosidase.Gitugotan usab niini ang bacterial β-galactosidase (gitawag nga lacZ ) nga magamit isip reporter sa lain-laing mga aplikasyon.

Sa duha-ka-hybrid nga pagtuki, ang β-galactosidase mahimong gamiton isip reporter sa pag-ila sa mga protina nga nakig-interact sa usag usa.Niini nga pamaagi, ang mga librarya sa genome mahimong ma-screen alang sa interaksyon sa protina gamit ang yeast o bacterial system.Kung adunay usa ka malampuson nga interaksyon tali sa mga protina nga gisusi, kini moresulta sa pagbugkos sa usa ka domain sa pagpaaktibo sa usa ka tigpasiugda.Kung ang tigpasiugda nalambigit sa usa ka lacZ gene, ang paghimo sa β-galactosidase, nga moresulta sa pagporma sa mga kolonya nga asul-pigmentado sa presensya sa X-gal, busa magpakita sa usa ka malampuson nga interaksyon tali sa mga protina.Kini nga teknik mahimong limitado sa screening nga mga librarya sa gidak-on nga ubos pa kay sa 106. Ang malampuson nga cleavage sa X-gal nagmugna usab og usa ka mamatikdan nga baho tungod sa pag-us-os sa indole.

Tungod kay ang X-gal mismo walay kolor, ang presensya sa asul nga kolor nga produkto mahimong gamiton isip pagsulay sa presensya sa aktibong β-galactosidase.

Kining sayon ​​​​nga pag-ila sa usa ka aktibo nga enzyme nagtugot sa gene alang sa βgalactosidase (ang lacZ gene) nga gamiton isip reporter gene sa lain-laing mga aplikasyon.