Mga produkto

Bag-ong high-performance liquid chromatography assay alang sa glycosyltransferases base sa derivatization nga adunay anthranilic acid ug fluorescence detection.

Ang mga assay gihimo gamit ang talagsaon nga labeling chemistry sa 2-aminobenzoic acid (2AA; anthranilic acid, AA) alang sa pagsukod sa mga kalihokan sa β1-4 galactosyltransferase (GalT-1) ug α2-6 sialyltransferase (ST-6) pinaagi sa high-performance liquid chromatography (HPLC) nga adunay fluorescence detection (Anumula KR. 2006. Pag-uswag sa fluorescence derivatization nga mga pamaagi alang sa high-performance liquid chromatographic analysis sa glycoprotein carbohydrates. Anal Biochem. 350: 1-23).Ang N-Acetylglucosamine (GlcNAc) ug N-acetyllactosamine gigamit isip mga acceptor ug uridine diphosphate (UDP) -galactose ug cytidine monophosphate (CMP) -N-acetylneuraminic acid (NANA) isip mga donor sa GalT-1 ug ST-6, matag usa.Ang mga produkto nga enzymatic gimarkahan sa situ nga adunay AA ug gibulag gikan sa mga substrate sa TSKgel Amide 80 nga kolum gamit ang mga kondisyon sa normal nga yugto.Ang mga yunit sa enzyme gitino gikan sa kinapungkayan nga mga dapit pinaagi sa pagtandi sa dungan nga mga sumbanan nga Gal-β1-4GlcNAc ug NANA-α2-6 Gal-β1-4GlcNAc.Ang linearity (oras ug konsentrasyon sa enzyme), katukma (intra- ug interassay) ug reproducibility alang sa mga assay natukod.Ang mga assay nakit-an nga mapuslanon sa pagmonitor sa mga kalihokan sa enzyme sa panahon sa pag-inusara ug pagputli.Ang mga assay sensitibo kaayo ug gihimo nga parehas o mas maayo kaysa sa tradisyonal nga radioactive sugar-based nga mga pagsukod.Ang assay format mahimo usab nga gamiton alang sa pagsukod sa kalihokan sa ubang mga transferase, basta ang carbohydrate acceptors adunay usa ka pagkunhod sa katapusan alang sa labeling.Usa ka assay alang sa glycoprotein acceptors gihimo gamit ang IgG.Usa ka mubo nga HPLC profiling nga pamaagi gihimo alang sa pagbulag sa IgG glycans (bintennary G0, G1, G2, mono- ug disialylated), nga nagpadali sa determinasyon sa GalT-1 ug ST-6 nga mga kalihokan sa paspas nga paagi.Dugang pa, kini nga pamaagi sa profiling kinahanglan mapamatud-an nga mapuslanon alang sa pag-monitor sa mga pagbag-o sa IgG glycans sa mga setting sa klinika.