Mga produkto

Ang oxidative nga kadaot sa mga base sa DNA kasagarang moresulta sa pagporma sa oxidized purines, ilabi na ang 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG) ug 7,8-dihydro-8-oxoadenine (8-oxoA), ang kanhi usa ka atabay. nailhan nga mutagenic samad.Tungod kay ang 8-oxoG dali nga gipailalom sa dugang nga oksihenasyon kumpara sa normal nga mga base, ang pagsulud sa usa ka base sa panahon sa DNA synthesis atbang sa usa ka oxidized nga porma sa 8-oxoG giimbestigahan sa vitro.Ang usa ka sintetikong template nga adunay sulud nga usa ka 8-oxoG nga samad una nga gitambalan nga adunay lainlaing usa ka electron oxidant o sa ilawom sa mga kondisyon sa singlet oxygen ug dayon gipailalom sa primer extension nga gi-catalyzed sa Klenow fragment exo- (Kf exo-), calf thymus DNA polymerase alpha (pol alpha). ) o human DNA polymerase beta (pol beta).Nahiuyon sa nangaging mga taho, ang dAMP ug dCMP gipili nga gisulud sa atbang sa 8-oxoG nga adunay tanan nga tulo nga mga polymerase sa DNA.Makapainteres, ang oksihenasyon sa 8-oxoG nakit-an nga nag-aghat sa dAMP ug dGMP nga pagsal-ot sa atbang sa samad pinaagi sa Kf exo- nga adunay lumalabay nga pagpugong sa primer extension nga mahitabo sa dapit sa giusab nga base.Dugang pa, ang samad naglangkob sa usa ka block sa panahon sa DNA synthesis pinaagi sa pol alpha ug pol beta.Ang mga eksperimento sa usa ka 8-oxoA-modified template oligonucleotide nagpakita nga ang 8-oxoA ug usa ka oxidized nga porma sa 8-oxoA nga direktang pagsal-ot sa dTMP ni Kf exo-.Mass spectrometric analysis sa 8-oxoG-containing oligonucleotides before and after oxidation with IrCl62-parehas sa oxidation sa panguna nga 8-oxoG site, nga miresulta sa pagporma sa guanidinohydantoin moiety isip mayor nga produkto.Walay ebidensya sa pagporma sa abasic nga mga dapit nga nakuha.Kini nga mga resulta nagpakita nga ang usa ka oxidized nga porma sa 8-oxoG, posible nga guanidinohydantoin, mahimong magdirekta sa sayop nga pagbasa ug sayop nga pagsulod sa mga dNTP sa panahon sa DNA synthesis.Kung ang ingon nga proseso nahitabo sa vivo, kini magrepresentar sa usa ka punto nga mutagenic nga samad padulong sa G--> T ug G--> C transversions.Bisan pa, ang katugbang nga oxidized nga porma sa 8-oxoA panguna nga nagpakita sa husto nga pagsulod sa T sa panahon sa DNA synthesis sa Kf exo-.